Rotavirus infeksjon

Influensa

Rotavirusinfeksjon eller intestinal / gastrisk influensa er en smittsom sykdom med symptomatisk behandling. Rotavirusinfeksjon er mest vanlig hos barn.

Rotavirusinfeksjon utgjør en spesiell fare for barn, siden de fleste infeksjoner forekommer i denne bestemte populasjonen.

Forårsakende middel for rotavirusinfeksjon

Infeksjonen er forårsaket av rotavirus - virus av familien Reoviridae, som ligner hverandre i antigenblanding.

Kilde for infeksjon

Kilden til infeksjon er en syk person. Den farligste med hensyn til overføring av infeksjon er pasienten i de første 3 - 5 dagene av kliniske manifestasjoner av rotavirusinfeksjon, siden i denne perioden er virusinnholdet i utskilt avføring størst.

Overføringsmekanisme

Hovedmekanismen for overføring av viruset er fekal-muntlig, sjeldnere - kontakt-husholdningsveien for forplantning gjennom overføring av rotavirus med infiserte objekter. Spesielt farlig i denne forbindelse er meieriprodukter. Lavtemperaturer ødelegger vanligvis ikke viruset, slik at lagring av mat i kjøleskapet ikke forhindrer utviklingen av rotavirusinfeksjon.

Periode av epidemi rotavirus infeksjon

Utbruddet av sykdommen skjer i høst-vinterperioden, men i andre årstider kan det også forekomme tilfeller av sykdommen. Som regel fordelingen og forekomsten av typiske symptomer på rotavirus infeksjon er ledsaget av fremveksten av en influensa epidemi, slik at folk rotavirusinfeksjon mer kjent som "intestinal influensa".

patogenesen

Etter å ha kommet inn i menneskekroppen kommer viruset inn i tynntarmens slimhinne, noe som medfører ødeleggelse av tarmens villi. Syntese av spesifikke enzymer, og sekretorisk funksjon brudd intestinal mucosa fører til alvorlig diaré og dehydrering av - for mottak i lumen av en stor mengde av elektrolytter og vann.

Symptomer på rotavirusinfeksjon:

  • nasal oppstramming
  • sår hals;
  • hoste;
  • magesmerter;
  • kvalme, oppkast, diaré;
  • hodepine, feber.

klinikk:

De viktigste perioder med rotavirusinfeksjon:

  • inkubasjonsperioden varer 1-2 dager;
  • akutt periode varer 3-7 dager;
  • utvinning, varer 4-5 dager.

Sykdommen kjennetegnes ved en akutt start, men tilstedeværelsen av en prodromal periode er mulig (ca. 2 dager). Kan forårsake utilsiktethet, generell svakhet, hodepine, økt tretthet, tap av appetitt, ubehagelige opplevelser og rommelse i magen. I tillegg er utvikling av manifestasjoner av sykdommen hos øvre luftveier mulig: nesevep, sår hals, lett hoste.

Det samlede kliniske bildet inkluderer syndromene av rus, gastroenteritt og lesjoner i øvre luftveier

Manifestasjoner av gastroenterittssyndrom inkluderer: høyt rommel i magen, smerte, for det meste på toppen av magen, kvalme, oppkast, diaré. Diaré med rotavirusinfeksjon har en vannaktig skumaktig konsistens og er gul eller grønn gul i fargen.

Manifestasjoner av rusksyndrom: tretthet, svakhet, hodepine. I alvorlige tilfeller: Svimmelhet, besvimelse.

Nederlaget i det øvre luftveiene er preget av rennende nese, nesestopp, sår hals, hoste. Zev når den har en lys rød farge.

Komplikasjoner og dødelighet

Alvorlige sykdomsformer, ledsaget av alvorlig dehydrering, er preget av utvikling av kardiovaskulær insuffisiens, til og med død (i 2-3% av tilfellene). Etter infeksjonen produseres en ustabil immunitet, som svekkes over tid, så re-infeksjon er mulig.

Diagnose av rotavirusinfeksjon

Diagnose av rotavirusinfeksjoner bare i tilfelle av påvisning av rotavirus i mennesker, ved anvendelse av slike laboratonyh diagnostiske metoder, for eksempel PCR - polymerase chain reaction PHA - passiv hemagglutinasjon, RAC - komplementfiksering, immunfluorescens og mange andre.

Fullstendig blodtelling vil vise leukocytose med et neutrofilt venstre skifte, økt ESR - i den akutte perioden. For gjenopprettingsperioden er preget av normalisering av blodbildet. Urinalyse vil vise protein-, leukocytt- og røde blodlegemer, hyalinesylindre i små mengder.

Rotavirusinfeksjon - behandling av tarminfluensa hos voksne og barn

Behandlingen er symptomatisk, da det ikke finnes noen spesifikke antirotavirusmidler for å bekjempe rotavirus.

Prinsipper for behandling av rotavirusinfeksjon:

  1. Isolering av en pasient med rotavirusinfeksjon
  2. Bekjemp mot dehydrering. Det er ønskelig å bruke spesielle saltløsninger for dette, for eksempel rehydron, saltoppløsning. De brukes til behandling av pasienten på sykehuset, men saltvann for å gjenopprette den normale syrebasen i kroppen kan tilberedes hjemme: 1 teskje til 1 liter vann. Det anbefales å drikke rikelig med mineralvann.
  3. Kampen mot temperatur må starte ved en temperatur på 38, 5 og over. På samme tid, avhengig av type feber, er det nødvendig å bruke fysiske metoder for å redusere temperaturen, for eksempel å gni kroppen med vann og kjemikalier - ta bestemte stoffer, hos barn er det bedre å bruke stearinlys.
  4. Godkjenning av enzympreparater, adsorberende og astringente midler (aktivert karbon, polysorb), melkesyrebakterielle preparater.
  5. Det er forbudt å ta smertestillende smerter i magen.

Indikasjoner for henvisning til sykehus for rotavirusinfeksjon:

  • progressiv forverring, langvarig diaré;
  • fremveksten av nye symptomer.

Kosthold for rotavirusinfeksjon:

Kostholdet inkluderer å unngå melk og meieriprodukter, inkludert meieriprodukter. Det er tilrådelig å inkludere kyllingbuljong eller risgrøt i kostholdet, kokt i vann uten å tilsette olje. Det er nødvendig å spise i små porsjoner med pauser. Det anbefales å begrense matinntaket med karbohydrater.

Forebygging av rotavirusinfeksjon

Viktige forebyggende tiltak for rotavirusinfeksjon inkluderer:

  • Forhindre at viruset kommer inn i kroppen, inkludert å isolere den syke, vanlige håndvaskingen, spise beviste og høykvalitets produkter, ved hjelp av destillert vann, vaske grønnsaker og frukt;
  • sanitær kontroll av cateringfasiliteter og produkter i butikker, markeder.

Før du bruker informasjonen fra nettstedet medportal.org, les vilkårene i brukeravtalen.

Brukeravtale

Nettstedet medportal.org gir tjenester underlagt betingelsene beskrevet i dette dokumentet. Ved å begynne å bruke nettstedet, bekrefter du at du har lest vilkårene i denne brukeravtalen før du bruker nettstedet, og godtar alle vilkårene i denne avtalen i sin helhet. Vennligst ikke bruk nettstedet hvis du ikke godtar disse vilkårene.

Tjenestebeskrivelse

All informasjon som er lagt ut på nettstedet, er kun til referanse, informasjon tatt fra offentlige kilder er referanse og annonserer ikke. Nettstedet medportal.org tilbyr tjenester som lar brukeren søke etter stoffer i dataene fra apotek som en del av en avtale mellom apotek og medportal.org. For enkel bruk av nettstedets data på rusmidler, er kosttilskudd systematisert og brakt til en enkelt stavemåte.

Nettstedet medportal.org tilbyr tjenester som lar brukeren søke etter klinikker og annen medisinsk informasjon.

ansvarsbegrensning

Informasjon som er plassert i søkeresultatene, er ikke et offentlig tilbud. Administrasjon av nettstedet medportal.org garanterer ikke nøyaktigheten, fullstendigheten og (eller) relevansen av de viste dataene. Administrasjon av nettstedet medportal.org er ikke ansvarlig for den skade eller skade du har hatt på grunn av tilgang eller manglende evne til å få tilgang til nettstedet eller fra bruken eller manglende evne til å bruke dette nettstedet.

Ved å godta vilkårene i denne avtalen, forstår du og er helt enig i at:

Informasjon på nettstedet er kun til referanse.

Administrasjon av nettstedet medportal.org garanterer ikke mangel på feil og uoverensstemmelser vedrørende deklarert på nettstedet og den faktiske tilgjengeligheten av varer og priser på varer i apoteket.

Brukeren forplikter seg til å avklare informasjonen om interesse ved å ringe til apoteket eller bruke informasjonen som er gitt etter eget skjønn.

Administrasjon av nettstedet medportal.org garanterer ikke mangel på feil og uoverensstemmelser vedrørende klinikkens arbeidsplan, deres kontaktdetaljer - telefonnumre og adresser.

Hverken administrasjonen av nettstedet medportal.org, eller noen annen part som er involvert i informasjonsprosessen, skal være ansvarlig for eventuelle skader eller skader som du måtte ha pådratt av å ha fullt ut avhengig av informasjonen på denne nettsiden.

Administrasjonen av nettstedet medportal.org forplikter seg og forplikter seg til å gjøre ytterligere anstrengelser for å minimere uoverensstemmelser og feil i informasjonen som tilbys.

Administrasjon av nettstedet medportal.org garanterer ikke fravær av tekniske feil, herunder med hensyn til driften av programvaren. Administrasjonen av nettstedet medportal.org forplikter seg så snart som mulig å gjøre alt for å eliminere eventuelle feil og feil i tilfelle deres forekomst.

Brukeren er advart om at administrasjonen av nettstedet medportal.org ikke er ansvarlig for å besøke og bruke eksterne ressurser, koblinger som kan finnes på nettstedet, gir ikke godkjenning for innholdet og er ikke ansvarlig for tilgjengeligheten.

Administrasjonen av nettstedet medportal.org forbeholder seg retten til å suspendere nettstedet, for å endre innholdet helt eller delvis, for å gjøre endringer i Brukeravtalen. Slike endringer utføres kun etter administrasjonens skjønn uten forvarsel til brukeren.

Du bekrefter at du har lest vilkårene i denne brukeravtalen og godtar alle vilkårene i denne avtalen i sin helhet.

Annonseringsinformasjon om hvilken plassering på nettstedet det er en tilhørende avtale med annonsøren, er merket "som reklame".

Rotavirus infeksjon

Rotavirusinfeksjon (rotavirus gastroenteritt) er en akutt smittsom sykdom forårsaket av rotavirus, karakterisert ved symptomer på generell forgiftning og skade på mage-tarmkanalen med utvikling av gastroenteritt.

ICD-10 kode
A08.0. Rotavirus enteritt.

Etiologi (årsaker) av rotavirusinfeksjon

Kausjonsmiddelet er et medlem av familien Reoviridae, et slekt av Rotavirus (rotavirus). Navnet er basert på den morfologiske likheten til rotavirus med et hjul (fra det latinske "rota" - "hjulet"). Under et elektronmikroskop ser virale partikler ut som hjul med et bredt nav, korte eiker og en tydelig definert tynn rand. En rotavirusvirion med en diameter på 65-75 nm består av et elektronisk tett senter (kjerne) og to peptidskjell: en ytre og en indre kapsel. Kjernen på 38-40 nm inneholder interne proteiner og genetisk materiale representert ved dobbeltstrenget RNA. Genomet av rotavirus hos mennesker og dyr består av 11 fragmenter, som antagelig er grunnen til det antigene mangfoldet av rotavirus. Replikasjon av rotavirus i menneskekroppen skjer utelukkende i tynntarmens epitelceller.

Rotavirusinfeksjon, visning i elektronmikroskop

Fire hovedantigener ble funnet i rotavirus; Den viktigste er gruppen antigen, proteinet av den indre kapsiden. Med hensyn til alle gruppespesifikke antigener, er rotaviruser delt inn i syv grupper: A, B, C, D, E, F, G. De fleste humane og animalske rotavirus tilhører gruppe A, innenfor hvilke undergrupper (I og II) og serotyper utmerker seg. Undergruppe II inkluderer opptil 70-80% av stammer isolert fra pasienter. Det er tegn på mulig sammenheng mellom visse serotyper med alvorlighetsgraden av diaré.

Rotaviruser er motstandsdyktige overfor miljøfaktorer: i drikkevann, åpne vannkilder og avløpsvann, holder de i opptil flere måneder, for grønnsaker - 25-30 dager, for bomull, ull - i opptil 15-45 dager. Rotaviruser blir ikke ødelagt ved gjentatt frysing, under desinfeksjonsløsninger, eter, kloroform, ultralyd, men dør når de kokes, behandles med løsninger med pH høyere enn 10 eller mindre enn 2. Optimale forhold for virus: temperatur 4 ° С og høyt (> 90%) eller lavt (Forfatter: Smittsomme sykdommer: Nasjonalt lederskap, redigert av ND Yuschuk, Yu. Ya. Vengerov. 2009

Diagnosen av rotavirusinfeksjon

jeg påstår
Nestleder
Chief epidemiologisk
Sosialdepartementets departement for helse
G.G.ONISCHENKO

7. mars 1989 N 15-6 / 6

Rotavirus infeksjon

(METODISKE REKOMMENDASJONER)

Institutt for poliomyelitt og viral encefalitt, Akademiet for medisinske vitenskap i Sovjetunionen.

Forskningsinstituttet for epidemiologi i Sovjetunionen Helsedepartementet;

Forskningsinstituttet for epidemiologi og mikrobiologi. GN Gabrievskogo Helsedepartementet i RSFSR;

Vitenskapelig Produksjonsforening "Rostepidkompleks";

All-Union Scientific Research Institute for desinfeksjon og sterilisering av Sovjetunionen Helsedepartementet.

Retningslinjer er ment for utøvere og forskere fra helsemyndigheter og institusjoner.

Human rotavirus tilhører en gruppe av virus som ligner på hverandre, som i tillegg til den inkluderer nebraska kalvdiarévirus (NCDV), epizootisk diarévirus hos unge mus (EDJM), abeavirus (SA-II), viruset som kommer fra tarminnholdet til sauer og storfe (0), samt patogener av diarégriser, føll, valper og andre dyr. Alle disse virusene har samme størrelse og form og er nær hverandre i antigeniske termer.

Rotavirus dyr oppdager seg godt i vevskultur, ble derfor isolert og studert før den humane rotavirus. Rotavirus av kalver og aper, på grunn av deres antigeniske nærhet til humant rotavirus, ble brukt til å etablere sin etiologiske rolle i akutt gastroenteritt og har blitt brukt til å finne ut i deres serologiske diagnostikk og for å oppnå immunoreagenser.

Humant rotavirus ble påvist ved elektronmikroskopi i duodenale epitelceller og i ekstrakter av avføring hos typiske pasienter, der det ofte finnes i meget signifikante konsentrasjoner (opptil 10 partikler i 1,0 g avføring). Rotavirus virion er en to-kapsid (dvs. belagt med tolags proteinkappe) sfærisk partikkel med en diameter på 70 - 75 nm, inneholder ribonukleinsyre - RNA (11 dobbeltstrengede segmenter), har en flytende tetthet i cesiumklorid på 1,36 g / cu. cm med sedimenteringskoeffisient 500 - 530 S

I følge de tilgjengelige egenskapene ble humant rotavirus, sammen med de ovenfor nevnte dyrevirusene, klassifisert som et rotavirus-slekt av familien Reoviridae. Navnet "rotavirus" er avledet fra den latinske roten - et hjul som en partikkel av et virus ligner i elektronmikroskopiske preparater.

Ifølge antigen-spesifisitet, oppdaget av ELISA, er rotaviruser delt inn i to undergrupper (betegnet av romerske tall - I og II), og ved spesifisitet detektert i nøytraliseringsreaksjonen, med 4 (og muligens flere) serotyper (betegnet med arabiske tall - 1 2, 3, 4). Undergruppens spesifisitet av visse rotavirus bestemmes av hovedproteinet til den indre kapsiden, og deres serotypiske spesifisitet bestemmes av glykoproteinet til den eksterne kapsid. Rotavirus av en ny type (såkalte pararotavirus) som ikke har et gruppespesifikt antigen, har nylig blitt oppdaget.

Rotavirusinfeksjon er utbredt. Informasjon om identifikasjonen er publisert i Australia, Storbritannia, GDR, Canada, India, Spania, USA, Frankrike, Japan og mange andre land. I Sovjetunionen har sykdommer i rotavirus gastroenteritt blitt registrert blant barn og voksne i en rekke regioner i RSFSR, Transcaucasia, Ukraina, Baltikum, Sentral-Asia og andre territorier. Blant barn og voksne kan rotavirusinfeksjon manifestere seg i form av sporadiske tilfeller, lokale gruppesykdommer og masseutbrudd med dekning av ulike befolkningsgrupper over store områder. Blant sykehuspasienter med akutte tarminfeksjoner, er andelen voksne med rotavirus gastroenteritt i gjennomsnitt 10-15%, barn 15-27% eller mer. Litteraturdata om isolering av rotavirus (antigen) hos friske barn og voksne er svært motstridende: fra 0-0,5 til 42% hos barn og fra 0% til 7% eller mer hos voksne. Rotavirusinfeksjon registreres gjennom hele året. Imidlertid oppdages over 70% av pasientene i den kalde årstiden. I vinterfjærperioden registreres også flertallet av utbrudd av rotavirusinfeksjon blant befolkningen, samt gruppesykdommer blant nyfødte og for tidlige babyer, barn av organiserte grupper, eldre. Det var ingen markerte forskjeller i fordelingen av rotavirusinfeksjoner (både barn og voksne) etter kjønn.

Kilden til infeksjon i akutte tarminfeksjoner av rotavirus etiologi er infiserte voksne og barn - pasienter med en åpenbar form for infeksjon eller asymptomatisk utskillende rotavirus med avføring. Samtidig er barn i det første år av livet ofte smittet fra mødre som er smittet med rotavirus, og eldre barn og voksne fra barn til organiserte barnegrupper. Infeksjon av mennesker fra dyr er ikke bevist, selv om muligheten for det ikke er utelukket. For tiden finnes rotaviruser av forskjellige serotyper i ekskreta av nesten 50 arter av dyr og fugler med uttalt tegn på diaré og uten dem.

Rotaviruser hos pasienter og personer uten kliniske manifestasjoner av sykdommen finnes for tiden bare i avføring. Pasienter utskiller rotavirus i miljøet fra og med den første sykdomsdagen, mens det oppdages maksimal mengde patogen i fæces (opp til 10 - 10 viruspartikler per 1 g) i løpet av de første fem dagene av sykdommen, som bestemmer den største epidemiologiske risikoen for pasienter til andre denne sykdomsperioden. I løpet av de neste 6 til 10 dagene faller utløsningen av rotavirus med avføring av pasienter skarpt som avføring normaliserer. Gjennomsnittlig varighet av utskillelse av rotavirus hos pasienter er 7-8 dager, men i noen pasienter kan denne perioden vare i 20-30 dager. Personer uten kliniske manifestasjoner av sykdommen kan langsiktig frigjøring av rotavirus med avføring - opptil flere måneder eller mer (observasjonsperiode).

Den viktigste mekanismen for overføring av rotavirus er fecal-oral, som er realisert ved vann, mat og innenlands overføringsruter. I tilfelle av sporadiske og lokale gruppesykdommer forekommer infeksjon med rotavirus hovedsakelig ved husholdningsmiddel. Dette bidrar til en svært lav patogen dose av rotavirus (innen 10 virale partikler). Det har blitt fastslått at rotavirus på ulike miljøområder beholder deres levedyktighet fra 10-15 dager (avhengig av temperatur og fuktighet) til en måned; i avføring fra flere uker til syv måneder.

For tiden registreres vann og mat utbrudd av rotavirus infeksjon i vårt land og i utlandet. Rotavirus finnes i vannet i elver, innsjøer, hav, grunnvann, vann fra springen, visse matvarer (melk, etc.).

Muligheten for implementering i noen tilfeller av drypp, støv og andre veier av rotavirus er antagelig.

Rotaviruser er også kjent som et av de viktigste etiologiske midlene i nosokominale utbrudd av akutt gastroenteritt. På sykehus med ulike profiler kan opptil 50-60% av syke barn bli smittet. Det er tilfeller av utbrudd i barselshjem. Ofte påvirker barn som er på kunstig fôring, lider av akutte og kroniske sykdommer, med ulike typer immundefekt.

Følsomhet immunitet. Folk i alle aldersgrupper er utsatt for rotavirus. Den største følsomheten er observert hos barn i alderen 6 måneder. opptil 2 år. Antistoffer mot rotavirus blir oppdaget hos 50-60% av barna i det første år av livet, i en alder av over 3 år - mer enn i 90% og i nesten alle voksne. Ifølge litteraturen indikerer tilstedeværelsen av antistoffer i serum imidlertid i utgangspunktet bare et møte av menneskekroppen med rotavirus, og ikke tilstedeværelsen av immunitet, siden det er mulig med gjentatte nivåer av humorale antistoffer, gjentatte sykdommer. Immunitet med rotavirusinfeksjon er ikke fullt ut forstått. Infeksjonsbestandighet antas å være hovedsakelig på grunn av lokal immunitet av tynntepitelceller, som er forbundet med tilstedeværelsen av sekretoriske antistoffer av IgA-klassen. Disse antistoffene finnes også i en ammende mors melk og virker som en faktor i passiv immunisering av nyfødte som, i fravær av kliniske manifestasjoner av sykdommen med avføring, kan frigjøre betydelige mengder rotavirus i miljøet og infisere premature babyer og barn med en ugunstig premorbid bakgrunn. Rotavirus av forskjellige serotyper oppretter ikke kryssimmunitet, og derfor kan det samme barnet eller voksen ha gjentatte sykdommer på grunn av andre serotyper av viruset. Den ustabile naturen av immunitet hos pasienter med rotavirus gastroenteritt er også kjent, gjentatte sykdommer registreres ofte 1-1,5 år etter infeksjonen.

Funksjoner av epidemien prosessen med rotavirus infeksjon:

- Ubiquity av territorial distribusjon;

- alvorlig vinter eller vinter vår sesongmessighet;

- lav smittsom dose av patogenet og høyfokus i organiserte grupper;

- skade på personer i alle aldersgrupper

- en høy andel tilfeller blant barn under 2 år med maksimal påvisning av sykdommer blant barn i andre halvdel av livet;

- høy aktivitet av vann og innenriks ruter av overføring;

- lokalitet av hjemmet foci, for det meste begrenset til familien;

- muligheten for asymptomatisk isolasjon av rotavirus blant barn og voksne;

- muligheten for nosokomial infeksjon med deltakelse av medisinsk personell og foreldre til syke barn.

Det kliniske bildet av rotavirusinfeksjon har mye til felles med de kliniske manifestasjonene av akutte tarmsykdommer av en annen etiologi, noe som gjør det vanskelig å diagnostisere denne sykdommen. Imidlertid er det en rekke karakteristiske forskjeller som gjør det mulig å i god tid mistenke denne sykdommen og gjennomføre anti-epidemiske og terapeutiske tiltak.

Inkubasjonsperioden er kort og varer fra 15 timer til 3 - 5 dager, men oftest - 1 - 3 dager.

De fleste pasientene har en akutt utbrudd av sykdommen, når hele symptomkomplekset utvikler seg i løpet av de første dagene av sykdommen. Hos små barn er en subakutisk start mulig, preget av utseendet i de første dagene av sykdommen med 1 eller 2 symptomer og tilsetning av resten fra 2 til 3 dager med sykdom. Den mest patognomone for rotavirusinfeksjon er skade på mage-tarmkanalen, som hos 60-70% av pasientene kombineres med utvikling av symptomer på luftveisskade. Noen ganger kan katarralsymptomer gå foran 3-4 dager med tarmdysfunksjon. Respiratorisk syndrom er preget av moderat hyperemi og granularitet av svelget, myke gane og palatinbuer, nesestopp, hoste, som, i motsetning til ARVI, er mindre uttalt, har ingen tendens til å øke og er kortvarige (4 - 5 dager). Diaré forekommer hos 95-97% av pasientene. For rotavirusinfeksjon er preget av utvikling av gastroenteritt, mindre enteritt. Stolen er vanligvis flytende, vassen, skummel, dårlig farget, uten urenheter eller med en liten del av slim. Hos små barn virker vannig diaré, noe som forklarer den hyppigere utviklingen av ekssikose i denne aldersgruppen. Frekvensen av avføring i gjennomsnitt ikke overstiger 4 til 5 ganger om dagen, men kan nå 15 til 20 ganger hos yngre barn. Varigheten av diaré hos voksne og eldre barn er 3 - 7 dager, hos spedbarn varer ofte opptil 10-14 dager. Oppkast er et kardinalsymptom og er notert hos 80% av pasientene med rotavirusinfeksjon. Oftest forekommer det samtidig med diaré eller på forhånd. Oppkast blir ofte gjentatt, men kortsiktig (1 - 2 dager). Gjentatt og ukontrollert oppkast for denne infeksjonen er ikke typisk og indikerer ofte en blandet infeksjon. Temperaturen går som regel ikke over 38,5 - 39 ° C og normaliseres med 3-4 dager med sykdom. De mest typiske tegn på generell rus er svakhet, sløvhet, svakhet, hodepine, svimmelhet. Alvorlighetsgraden av sykdommen bestemmes av utviklingen av isotonisk ekssikose, I-II grad, mindre ofte III-grad, noe som er vanlig hos spedbarn. Samtidig er elektrolyttap (Na og K) små, som må tas i betraktning ved gjennomføring av rehydreringsbehandling.

4. Diagnose og differensialdiagnose

En objektiv undersøkelse hos pasienter bemerket sløvhet, konjunktival hyperemi og vaskulær injeksjon av sclera. Tunge moderat belagt, tørr. Magen er myk, moderat smertefull på palpasjon i tynntarmen. Lever og milt er ikke forstørret. Blind og sigmoid kolon myk, smertefri. Blodtrykket er redusert. Pulsen er ikke overbelastet, men heller er det en tendens til relativ bradykardi. Det er ingen meningale fenomener. I perifert blod, i begynnelsen av sykdommen, kan moderat leukocytose forekomme, fra 2 til 3 dager av sykdommen er det en tendens til leukopeni med en reduksjon i antall leukocyttestikker og en økning i antall lymfocytter og monocytter, er ikke ESR akselerert.

I laboratorieanalysen av urin er det en liten albuminuri, en raskt forbigående mikrohematuri, en liten økning i antall leukocytter, og utseendet av hyalinflasker er mulig. Endringer i urinen er i tråd med alvorlighetsgraden av sykdommen og dehydrering.

Mikroskopisk undersøkelse av avføring Antallet leukocytter overstiger ikke 10-15 i synsfeltet, det er en blanding av slim.

Rektoromanoskopisk er det mulig å avsløre moderat hyperemi av slimhinnen i endetarm og sigmoid-kolon uten fokale endringer.

Rotavirus gastroenteritt er delt av alvorlighetsgrad, som bestemmes av intensiteten av diaré og dehydrering forårsaket av den, samt alvorlighetsgraden av generell forgiftning. Det er tre grader av rotavirus gastroenteritt: mild, moderat tung og mindre alvorlig.

Differensiell diagnose utføres med salmonellose, kolera, dysenteri, matbårne toksikosinfeksjoner forårsaket av betinget patogene mikroorganismer, persiniose og annen viral gastroenteritt.

Gastrointestinal form av salmonellose er preget av den samtidige sykdommen hos personer som spiste produkter av dårlig kvalitet. Vanlig akutt utbrudd: hypertermi, alvorlig kuldegysninger, oppkast, alvorlig magesmerter, kraftig fetisk avføring som beholder sin fekale karakter, nøytrofil leukocytose med et skifte av leukocyttformelen til venstre. Når salmonellose, det er ingen endringer i svelgen i svelgen, er leveren vanligvis forstørret. Isolering av patogenet i den bakteriologiske undersøkelsen av avføring, oppkast eller magesvikt løser diagnosen.

Ifølge mange kliniske tegn på masse og rask sykdom, kan rotavirus gastroenteritt lignes på kolera. Men rotavirusinfeksjon er preget av et mildere kurs, og særlig ved at det ikke utvikler tilstanden til algid, så vel som tilstedeværelsen av typiske endringer i slimhinnet i oropharynxen.

Det viktigste er resultatene av bakteriologisk forskning ved detektering av Vibrio cholerae. En lignende situasjon oppstår med NAG-infeksjon.

Bakteriell dysenteri preges av akutt magesmerter, hyppig, noen ganger falsk, oppfordring, avføring blandet med mucus og blod, merket sigmoiditt, konstant feberreaksjon, patologiske forandringer i den distale delen av tykktarmen i henhold til rektoskopi. Alle disse tegnene, samt resultatene av bakteriologisk forskning, gjør det relativt enkelt å utføre differensialdiagnostikk for kolittformen av dysenteri. Med gastroenterisk form av dysenteri øker verdien av bakteriologiske undersøkelsesresultater dramatisk.

Differensial diagnostikk av rotavirus gastroenteritt og matbårne toksikosinfeksjoner forårsaket av opportunistiske patogener er spesielt vanskelig, gitt manglende kunnskap om det kliniske bildet av disse sykdommene. Ifølge laboratorieundersøkelsens diagnostiske betydning bør det gis fortrinn til positive resultater av virologiske og immunologiske studier som bekrefter sykdommen rotavirus, i stedet for på deteksjon av betinget patogene bakterier i pasientens avføring.

For den gastrointestinale formen av periniose er et mer gradvis utbrudd karakteristisk, tilstedeværelsen, sammen med gastroenteritt, av smerter i muskler og ledd; leveren er vanligvis forstørret; avføringen er viskøs på grunn av en betydelig blanding av slim, og noen ganger er blod mulig. Leukocytose er notert i blodet; ESR økte.

Gastroenteritt syndrom kan være fremtredende i noen virussykdommer. Disse inkluderer adenoviral infeksjon, som i tillegg til intestinale lesjoner er preget av konjunktivit, rhinitt, faryngitt, tonsillitt, bronkitt, lungebetennelse, økning i livmorhalsk lymfeknuter, lever, milt, langvarig feber.

Fra enteritt og gastroenteritt, forårsaket av enterovirus av Koksaki og ECHO, er rotavirus gastroenteritt preget av et monosyndromisk klinisk bilde, hvor tarmskader tar det ledende stedet. I motsetning til at epidemiutbruddene av enterovirus naturen oppstår, er forekomsten av ulike kliniske former av sykdommen notert, "multiformitet" av det kliniske bildet, der symptomer på skade på membranene i hjernen, huden og øvre luftveier kan spille en betydelig rolle.

Differensiell diagnose av rotavirusinfeksjon med kolibacillose hos barn er vanskelig og kan baseres på følgende kriterier:

- større akutt utbrudd av rotavirusinfeksjon sammenlignet med kolibacillose, spesielt forårsaket av enteropathogen kolibacillose;

- raskere utvinning fra rotavirusinfeksjon, selv hos små barn;

- høyere frekvens av respiratorisk syndrom ved rotavirusinfeksjon, men dens mindre alvorlighetsgrad og varighet.

Den største vanskeligheten er diagnosen blandede rotavirus-bakterielle infeksjoner, hvorav andel i vinterhalvåret er ganske stor (7 - 10% av alle OKI).

En egenskap hos klinikken med blandede infeksjoner er tilstedeværelsen av symptomkomplekser som er karakteristiske for begge kombinerte infeksjoner: en økning i symptomene på rusmidler, utseendet på tegn på betennelsesforandringer i slimhinnet i den lille og tyktarmen, og en langsommere utvinning.

Sykehusisering av barn og voksne med mistanke om OCI forårsaket av rotavirus, utføres i henhold til klinisk (sykdomssvikt) og epidemiologiske indikasjoner (tilstedeværelse av svake barn i pasientens miljø, barn i det første år av livet, tilskudd til barnehageinstitusjoner, matarbeidere manglende evne til å overholde anti-epidemic regime hjemme, etc.). Barn under ett år med alvorlige OCI-symptomer blir innlagt på sykehus først. Separat sykehusinnleggelse av pasienter med mistanke om rotavirus gastroenteritt og akutte tarminfeksjoner av en annen etiologi (separate avdelinger, bokser) er obligatorisk. Prinsippet om "engangs fylling" av kamre (bokser) må observeres.

Behandling av pasienter med rotavirus gastroenteritt, tatt hensyn til eksisterende ideer om patogenesen av denne sykdommen, inkluderer et sparsomt skjema og kompensasjon for brudd på funksjonell tilstand av tarmen, gjenoppretting av hydroelektrolytsbalanse og avgiftning av kroppen.

På tidspunktet for sykdommens akutte periode foreskrives et 4-B diett, der det er en kraftig begrensning av karbohydrater (opptil 200 g) og en økning i mengden protein (opptil 150 g) med en liten reduksjon av kaloriinnholdet (2400 cal.). Mengden sukker er begrenset til 40 g per dag, grønnsaker og frukt. Melk er utelukket. Salt er ikke begrenset.

Viser tilordningen av slike fordøyelses polyenzyme stoffer norskproduserte som oraz, solizim, somilaza som ved behandling av pasienter med rotavirus-gastroenteritt er ikke dårligere enn importert (panzinorm, Digestal, fest, triferment og andre).

Graden av dehydrering av organismen vurderes nødvendigvis, og terapi utføres for å fylle opp overflødig tap av vann og salter. Når dehydrering er I - II grad i henhold til V.I. Pokrovski stille glukose-elektrolytt orale løsninger (rehydron glyukosolan) med tap av væske og elektrolytter, og III i det avvanning grad som er nødvendig for å begynne behandling med intravenøse vandige saltoppløsninger (Trisol, kvartesol, Chlosol, Acesol) og andre.

Taktikken for innføring av løsninger utføres i samsvar med prinsippene for rehydreringsterapi.

For å stabilisere normal blodsirkulasjon og avgiftning, kan du legge inn kolloidale løsninger (gemodez, polyglukin, reopolyglukin).

Det må understrekes at reseptbelagte antibakterielle legemidler, hvis det ikke er en samtidig bakteriell infeksjon, ikke er berettiget.

Det anbefales å bruke adsorbent og astringent medikamenter.

Behandling av virusinfeksjon er foreløpig ikke utviklet.

Utdrag av konvalescenter utføres etter en stabil (innen 2 - 3 dager) normalisering av avføringen og forsvunnelsen av alle andre kliniske symptomer på den underliggende sykdommen i fravær av komplikasjoner.

Barn som går på barnehageinstitusjoner, matfasilitetsarbeidere og personer likestilt med dem, får en engangs virologisk undersøkelse etter at kliniske symptomer forsvinner.

De resterende kontingenter av pasienter er ikke gjenstand for obligatorisk laboratorieundersøkelse.

6. Laboratoriediagnose

Laboratoriediagnostisering av rotavirus gastroenteritt er for tiden ikke vanskelig. Den raske utviklingen av klinisk syndrom og kortvarig sykehusopphold dikterer behovet for bruk av raske metoder for å bestemme sykdommens etiologi. De fleste laboratoriediagnostiske metoder som anbefales i denne håndboken, lar deg oppdage rotavirus i løpet av den første dagen. Valg av metode i hvert tilfelle bestemmes av laboratorieutstyret, samt tilgjengeligheten av passende reagenser.

Tradisjonelle metoder for å oppdage serologiske endringer i pasientens serum (nøytraliseringsreaksjon, hemagglutinasjonsinhibering og komplementfiksering) er viktige i den retrospektive analysen av sykdommen. For den tidlige serologiske diagnosen av rotavirusinfeksjon anbefales derfor bestemmelse av IgM-klasse antistoffer.

Hensikten med den virologiske studien av en syke er vanligvis avføring. Tilstedeværelse og distribusjon av rotavirus i miljøet oppdages ved å undersøke prøver av jord, mat og vann (avløpsvann, vann fra naturlige og kunstige reservoarer, drikkevann).

6.1. Påvisning av rotavirus i klinisk materiale

og i miljøprøver

6.1.1. Prøve forberedelse for testing; sampling

Når vi tar prøver for virologisk forskning, oppfylles noen generelle krav, og tar tiltak for å beskytte materialet mot forurensning. Prøver tas kun i sterile retter med en tett gummipropp, forsterket lim. Transportprøver i beholdere med is eller kjølemiddel.

6.1.2. Suspensjonspreparat, avklaring,

prøve rengjøring, fjerning av bakteriell flora

Fremstilling av prøver av avføring for en studie på rotavirus inkluderer fremstilling av en 10% suspensjon, homogenisering, sentrifugering ved 3000 rpm. innen 30 minutter for å fjerne bakterieflora. Ved undersøkelse av gjenstander av miljø og matvarer utføres prekonsentrasjon av det studerte materialet.

6.1.3. Konsentrasjon av viruspartikler i vannprøver

Konsentrasjon av rotavirus er en viktig betingelse for å øke effektiviteten av deres deteksjon i vannlegemer i miljøet.

Metoden for å konsentrere rotaviruser ved bruk av adsorpsjonskromatografi på porøst kisel-makroporøst glass (MPS) - er enkelt og praktisk ved bruk av vannvolumer fra 0,1 til 10 liter. Når en prøve passeres gjennom et lag av MPS, blir viruset sorbert på overflaten av glasset. For eluering av viruset ved hjelp av løsninger som har evnen til å forårsake desorption av viruset. Viruset blir fjernet fra glasset med et lite volum av oppløsning, noe som fører til en konsentrasjon på flere hundre ganger i forhold til den opprinnelige prøven.

For å forbedre adsorpsjonsegenskapene behandles husholdningsprodukter av glass i MPS-1000 VGH-merket som følger: En blanding (1: 1) 3% HO og 6 M HC1 fremstilles. Glasset fylles med den fremstilte blanding med en mengde på 1 volum glass for 2 volumer av blandingen. Kok i en avtrekksdeksel (uten stopp) i 1 time, observere sikkerhetsregler. Vask til nøytral pH med destillert vann. Tørk ved 100 ° C.

Glass kolonne, forbehandlet med silikonfluid, fylt med glass (2 - 3 cc.), Soaked i destillert vann. Til prøveprøven (3 liter) tilsettes 1 M oppløsning av MgCl til en sluttkonsentrasjon på 0,05 M. Vann føres gjennom kolonnen med en hastighet på 150-500 ml / time, og justerer strømningshastigheten ved hjelp av klemmer. Passer gjennom kolonnen 10 ml av en elueringsløsning: kjøttekstrakt 3%, pH 9,0; eller tryptosefosfatbuljong 1%, pH 9,0; eller Tris HC1 0,1 M, inneholdende 2 M NaCl, pH 11,0 (oppløsninger er oppført i rekkefølge for å redusere deres eluerende egenskaper). Sorbat fraksjonene med et volum på 1 ml, pH-verdien i fraksjonene bringes til en nøytral verdi.

6.2. Påvisning av virale partikler ved hjelp av elektronmikroskopi (EM) og immunoelektronmikroskopi (IEM)

Siden innholdet av rotaviruspartikler i avføring av typiske pasienter vanligvis er høyt i de første 2-3 dagene av sykdom, er EM-metoden mye brukt til å oppdage rotavirus, som kan brukes til å detektere rotaviruspartikler uten ytterligere konsentrasjon av fecalsuspensjonen.

For fremstilling av legemidler påføres en dråpe av undersøkt 10% suspensjon på en tallerken med dental voks eller vokspapir. På en dråpe av filmsubstratet pålegges et emne elektronmikroskopisk rutenett. Etter 1 - 3 minutter rutenettet vaskes på en dråpe destillert vann og en kontrastløsning (2% oppløsning av fosforotungsyre, justert til pH 6,5 - 6,6 med 1 NKOH), hvorav overskudd etter 30 - 40 sekunder. fjern filterpapiret og masken tørkes. Vise av forberedelsene utføres i et elektronmikroskop med en instrumental forstørrelse på 30-50000x.

Rotaviruser blir ganske enkelt oppdaget ved EM-undersøkelse av fecale suspensjoner i karakteristiske størrelser og morfologi av virale partikler. Rotaviruser skal differensieres fra ulike viruspartikler og viruslignende formasjoner, bakteriofagpartikler og bakteriell flagella funnet i fekalt materiale.

Bruken av IEM-teknologien gjør det mulig i enkelte tilfeller ikke bare å øke prosentandelen av deteksjon av rotavirus, men også å bevise deres etiologiske rolle. For IEM-studien blandes 0,1 ml 1: 5 fortynnet immunserum av dyr med 0,4 ml 10% fekal ekstrakt. Blandingen inkuberes i 1 time ved romtemperatur og deretter i 12 timer ved 4 ° C, hvorpå den sentrifugeres i 90 minutter. ved 15.000 rpm Supernatanten dreneres, og det resulterende bunnfall resuspenderes i noen få dråper destillert vann, kontrasteres med en 2% oppløsning av fosforotungstinsyre (pH 6,5) og plasseres på objektgitter; overskytende fuktighet fjernes med filterpapir. Studien av medisiner utføres i et elektronmikroskop med en instrumentell forstørrelse på 50000x, ser på minst fem celler i faggitteret. I tilfelle av et positivt resultat, oppdages rotaviruspartikler i preparater i form av spesifikke klynger (immunkomplekser).

6.3. Påvisning av rotavirus antigen i testmaterialet

6.3.1. Få immunoreagenser

Hyperimmunsera og spesifikke rotavirusimmunoglobuliner oppnås ved immunisering av kaniner, marsvin, høner.

Antigen for immunisering ble fremstilt på følgende måte: 5 ml av kultursuspensjonen rotavirus SA-II trypsinert, noe som gjør madrasser i 1,5 liters kolber med et monolag av heteroploid ape nyreceller av en grønn 4647, inkubert i 60 minutter ved 37 ° C; Tilsett serumfritt vedlikeholdsmedium og inkuber i 24 til 48 timer ved 37 ° C. All biomasse blir utsatt for 3 ganger frysing eller sonikering, tilsatt PEG M 6000 til 8 - 10% konsentrasjon, la i 20 timer ved 4 ° C, deretter sentrifugert ved 10.000 rpm. 2 timer Pelleten resuspenderes i PBS (1/30 - 1/50 av biomassevolumet). Etter rengjøring med freon 113 blir den vandige fase brukt til å immunisere dyr og som et antigen i immunologiske studier. Konsentrat i et volum på 1 ml inneholder minst 10 viruspartikler.

Immunisering av kaniner: kaniner injiseres intravenøst ​​med 2 ml rotaviruspreparatet på dagene 1, 7, 35, 42 og blod tas på dag 49 etter starten av immuniseringen. På dagene 1 og 35 injiseres antigenet med en ekstra Freunds komplette adjuvans ved flere punkter på ryggen.

Immunglobulinfraksjonen ble utfelt fra hyperimmunt kaninserum 10% vandig løsning av polyetylenglykol (PEG) med molekylvekt 6000. Bunnfallet ble oppsamlet ved sentrifugering og oppløst og dialysert mot 0,01 M K-fosfatbuffer (pH - 7,4) med 0:01 M Næring ( FSB). Konsentrasjonen av immunglobuliner bestemt spektrofotometrisk.

Immunisering av marsvin: dyr injiseres intramuskulært med 0,5 ml av en konsentrert rotaviruspreparat med et lik volum Freunds komplette adjuvans på 1,14 og 28 dagers blodprøve to uker etter siste immunisering.

Immunisering av kyllinger: 20 uker gamle kyllinger av legg høner av hybrider av den hvite leghorn Zarya-17 rasen blir immunisert intravenøst ​​på 1, 14, 28 dager. Under den første immuniseringen administreres antigenet i tillegg intramuskulært i en blanding med et like volum Freunds komplette adjuvans. Maksimal mengde antistoff i eggeplommen observeres etter den tredje immuniseringen. Kyllinger kan brukes permanent etter reimmunisering.

Isolering av kyllinger-immunoglobuliner: Gullet separeres fra proteinet i skallet eller Büchner-trakten og vaskes med vann fra springen. Øyenblommen (10 ml) overføres til et sentrifugerør, tilsett dobbeltvolum (20 ml) av FSB og bland godt sammen. PEG 6000 påføres på en konsentrasjon på 3,5% (vekt / volum) og blandes i 10 minutter. ved 14000 g. Supernatanten filtreres gjennom et filterpapir i en oppgradert sylinder. Tilsett ekstra PEG 6000 til en sluttkonsentrasjon på 12% og bland. De utfelte immunglobuliner oppsamles ved sentrifugering (10 min. 14 000). Bunnfallet oppløses i 5 ml FSB (1/2 volum av eggeplomme). Konsentrasjonen av protein i preparatet er vanligvis 6-12 mg / ml.

6.3.2. Metode for enzymimmunoassay (ELISA)

Metoden for enzymimmunoassay (ELISA), basert på bruk av antistoffer merket med et enzymmolekyl (peroksidase), er en av de mest vanlige og effektive og spesifikke metoder for å påvise virusantigen. Bruk vanligvis direkte og indirekte "sandwich" -alternativene. Enzymarkør detektert i fargereaksjon med substratet. Den direkte ELISA-varianten er raskere enn den indirekte, men den er mindre følsom og spesifikk. I formuleringen av en indirekte variant anvendes et anti-spesifikt kommersielt konjugat av immunglobuliner med et enzym; For å forhindre uspesifikke interaksjoner mellom konjugatet og antistoffene sorbert på panelet, er det nødvendig å ha antiviralsera av to forskjellige dyrearter.

Indirekte ELISA-variant: 0,1 ml anti-tromtaunimmunoglobuliner fra eggeplommen av egg av immuniserte kyllinger i halvparten (48) av brønnene blir introdusert i brønnene. I den andre halvdel blir immunglobuliner fra egg lagt før immunisering introdusert som negativ kontroll. Sorpsjonen av immunglobuliner utføres fra en oppløsning med en konsentrasjon på 5 ug / ml i PBS natten over ved 4 ° C. Innholdet i brønnene dreneres, brønnene vaskes med PBS-T og 0,1 ml av prøveprøven påføres i PBS-T med 1% BSA og 0,01 M EDTA til brønnene med antirotavirus og normale immunoglobuliner og inkuberes i 1 time ved 37 ° C.

Etter vask ble 0,1 ml kanin anti-rotavirus serum fortynnet til 1: 1000-1: 25000 tilsatt brønnene i PBS-T buffer. Den optimale fortynningen av serum bestemmes i forhåndsdefinerte eksperimenter. Panelene lukkes og inkuberes i 2 timer ved 37 ° C. Brønnene vaskes og 0,1 ml av et kommersielt preparat av peroksidasemerkede antistoffer mot kanin-IgG i en konsentrasjon på 1 til 2,5 ug / ml i innhold av peroksidase i PBSB-T-BSA tilsettes og inkuberes i 1 time ved 37 ° C. Brønnene vaskes, tilsett 0,1 ml ferskt tilberedt substratblanding (O-fenylendiamin 0,5 mg / ml i 0,05 M Na-citratbuffer pH 5,0, HO - 0,03%. vær forsiktig!)) og inkuber ved romtemperatur i mørket i 30-40 minutter. Den enzymatiske reaksjonen stoppes ved å tilsette 0,05 ml 3 M H SO. Resultatene av reaksjonen tar hensyn til visuelt eller spektrofotometrisk. Prøver anses å være positive, hvis optiske tetthet ikke er mindre enn 2 ganger den optiske tettheten av den negative kontrollen.

6.3.3. Coagglutinasjonsmetode

Denne metoden er basert på evnen til protein En Staphylococcus aureus av Cowan-stammen for å koble til Fc-fragmentet av IgG, og under dannelsen av et spesifikt antigen-antistoffkompleks forårsaker agglutinasjonsfenomenet.

For formuleringen av koagglutineringsreaksjonen anvendes et kommersielt tørt stafylokokreagensholdig protein A (Pasteur Research Institute of Electrochemical Medicine, Leningrad), som rehydreres før bruk i en 0,1% løsning av metylenblå.

Tidligere ble hver serie av hyperimmun serum testet for tilstedeværelse av antistapylokokantistoffer. For å gjøre dette blander du på samme glidelåse like store mengder serum ved fortynning av 1: 500 og 10% suspensjon av stafylokokker. Ta hensyn til resultatene innen 5 minutter etter utdanning agglutinat. For arbeidet med valgt serum, som ikke inneholder antistapylokok antistoffer ved en fortynning på 1: 500. For fremstilling av diagnostikkblanding blandes 0,01 ml anti-ratavirus serum fortynnet 1:10 med FSB med 0,5 ml 10% suspensjon av stafylokokker, holdes ved romtemperatur i 1 time, deretter tilsettes 9,5 ml FSB (diagnostikk). På samme måte er stafylokokker følsom med preimmun serum (kontrollreagens). Diagnostisk og kontrollreagens brukes i reaksjonen av PKA og TRKA.

For å lagre RCA i de uformede brønnene i panelet, lag 0,05 ml PBS pH-7,4; i to brønner gjør Takacchi mikrotiter eller dispenser 0,05 ml av 10% suspensjon av avføring og tilberede serielle to-gangs fortynninger på 1: 2-1: 256. Til brønnene i første rad legger du til 0,05 ml diagnostikk og til brønnene i den andre raden 0,05 ml kontrollreagens. Panelene er dekket med lokket og inkubert i en termostat ved 37 ° C - 3 timer. I hvert forsøk ble en prøve av en suspensjon av avføring positivt og negativt for rotavirus, samt lysater av celler infisert med rotavirus SA-II, testet tidligere ved elektronmikroskopi.

Betraktning av reaksjonen: Resultatene anses å være positive når en agglutinasjons "paraply" detekteres sammen med diagnosen, med et negativt resultat eller en 4-ganger reduksjon i titer parallelt med kontrollreagenset. Resultatene anses negativt når diskene dannes i begge parallelle rader. For å eliminere ikke-spesifikk koagglutinering i de parrede rader, adsorberes avføringssuspensjonen med et lik volum normal kaninserum ved 37 ° C i 2 timer, etterfulgt av oppvarming ved 80 ° C i 45 minutter. Deretter opplever du reaksjonen av koagglutinering.

6.3.4. Metode for fastfasereaktjon av koagglutinasjon (TRKA)

Denne metoden for å detektere rotavirusantigener er basert på prinsippene for fastfase-immunanalysemetoden (se 4.3.2). I motsetning til sistnevnte bruker TRCA imidlertid ikke enzymet som en etikett, men diagnostisk og kontrollreagenset (se 4.3.3).

For staging bruker TRKA immunologiske paneler med uformede brønner. For sensibilisering tilsettes 0,1 ml hyperimmun serum fortynnet med 0,01 M karbonat-bikarbonatbuffer (pH 9,6) 1: 1000 til brønnene. Serumpaneler blir igjen i 2 til 3 timer ved 37 ° C. Ikke-bundet til fastfaseantistoffene fjernes ved vasking tre ganger i 3 minutter. FSBT. Deretter gjør 0,05 ml av de studerte, så vel som åpenbart positive og negative prøver (2 brønner for hver prøve) i brønnene og la dem stå i 2 timer ved 37 ° C for å danne antigen-antistoffkomplekser. Ubundet antigen og beslektede urenheter fjernes ved triple hvitvasking av PBS. Deretter tilsettes i en brønn 0,05 ml 0,5% stafylokokdiagnostik, i den andre (kontroll) 0,05 ml 0,5% suspensjon av stafylokokker som er sensibilisert med preimmun serum (se 4.4.3). Inkubasjon utføres enten i 1 til 2 timer ved 37 ° C, etterfulgt av plassering i 1 til 3 timer ved 4 ° C, eller i 18 til 24 timer ved 4 ° C. Resultatet av agglutineringsreaksjonen tas i betraktning visuelt: med en positiv reaksjon danner de agglutinerte bakteriene en paraply; med en negativ reaksjon - bakteriene fullstendig bosette seg i form av en disk.

6.3.5. Metode for indirekte hemagglutinering

I denne metoden er deteksjonen av rotavirusantigen basert på bruk av et erytrocyt-antistoffdiagnostikk, som er en får erythrocytter sensibilisert av immunoglobulin ascitesvæsken av hvite rotter immunisert med rotavirus SA-II.

Tofolds fortynninger av 10% fekal suspensjon i panelbrønnene testes med et erytrocytt diagnostisk materiale. Agglutinering av erytrocytediagnostikk indikerer tilstedeværelsen av rotavirusantigen i prøven. En detaljert beskrivelse av prosedyren for formulering av PHA er angitt i instruksjonene vedlagt preparatsettet (Scientific-Production Association "Rostepidkompleks", Rostov-til-Don).

Rotatest-settet er basert på revers passiv hemagglutinasjon og er konstruert for å oppdage rotavirus i avføring og å oppdage antistoffer mot rotavirus i blodsera.

6.3.6. Metode for immuncytokjemisk deteksjon av rotavirus

Metoden er basert på immunokemisk bestemmelse av virus antigen syntetisert i celler som et resultat av infeksjon med et virusholdig materiale.

Fordelen med metoden sammenlignet med ELISA er i høyere følsomhet, så vel som evnen til å bestemme og kvantifisere infeksjonsevnen i testprøven.

Staging av forsøket: Transplanterte celler av nyren til en grønn ape i en konsentrasjon på 3 til 10 celler / ml, gjør 0,2 ml i brønnene i flatbunnplater og inkuber ved 37 ° C (24 til 48 timer). Cellene vaskes deretter med Eagle-MEM-medium. Testmaterialet fortynnes i Eagle-MEM-medium, aktivert i 1 time ved 37 ° C i nærvær av 10 μg / ml trypsin og tilsatt i 0,1 ml i minst 4 brønner. Positive kontroller er brønnene der materialet som er kjent for å inneholde rotavirus, er satt inn. Negative kontroller: brønner med uinfiserte celler og brønner, hvor materiale er introdusert som testen, men ikke inneholder rotavirus. Adsorbsjon utføres i 1 time ved 37 ° C, deretter blir mediet fjernet, cellene vaskes med Eagle-MEM-medium. Tilsett 0,2 ml Eagle-MEM-medium med 1 μg / ml trypsin i brønnene og inkuber i 48 timer ved 37 ° C.

Celler vaskes to ganger med saltoppløsning og festes med kaldt (-20 °) 85% aceton, inkuberes i 2 timer ved -20 ° C, deretter fjernes aceton. Panelet vaskes 3 ganger med PBS inneholdende 0,05% Tween 20 (PBS-T). 0,1 ml fortynnet 1: 1000 i PBS-T immun rabies anti-rotavirus serum blir tilsatt til brønnene. Inkuber i 2 timer ved 37 ° C. Etter vasking av panelet tilsettes 0,1 ml av et peroksidase-merket anti-IgG-kaninantistoff (kommersielt preparat) til brønnene i en brønn i en konsentrasjon på 2 ug / ml ved innholdet av peroksidase i PBS med 1% BSA og inkuberes i 1,5 timer ved 37 ° C C.

Panelet vaskes 2 ganger med PBS-T og 1 gang med 0,05 M acetatbuffer, pH 5,0. 0,1 ml av en nyfremstilt oppløsning av peroksidasesubstrat inneholdende 10 ml acetatbuffer / 4 mg 3-amino-9-etylkarbazol (AEC) oppløst i 0,5 ml aceton og 0,01 ml 33% hydrogenperoksid tilsettes brønnene. (OBS! Arbeid med AEC krever forsiktighet). Inkubér i 30-40 minutter. i mørket ved romtemperatur. Reaksjonen stoppes ved vasking av panelet med destillert vann.

Regnskap for reaksjonen utføres under et lysmikroskop med liten forstørrelse. Negative kontrollbrønner må ikke inneholde farget celler. Lokale klynger av fargede celler er fokus for virusinfeksjon.

6.3.7. Immunofluorescensmetode

For å identifisere rotavirusantigenet ved bruk av immunfluorescens, anvendes en cellelinje 4647. Cellene dyrkes på deksler eller glidelåser innelukket i penisillinflasker eller -rør. Den infiserte kulturen inkuberes ved 37 ° C i 24 til 48 timer, hvoretter brillene fjernes fra hetteglassene, vaskes i 0,15 M saltoppløsning med tilsetning av fosfatbuffer ved pH 7,2, skylles med destillert vann og tørkes i luft. Deretter er preparatene festet i to skift (10 minutter hver) av kjemisk ren aceton avkjølt til 4 ° C.

Preparatene behandles ved en indirekte metode i et fuktig kammer. En dråpe immunrot rotavirus kaninserum påføres dyrkningscellene og inkuberes i 30 minutter. ved 37 ° C, deretter blir legemidlene vasket tre ganger i FSB og fjern overflødig fuktighet. Våt preparater farves med en blanding av like mengder anti-FITC-konjugat og bovint albumin, merket med rhodamin og inkuberes i 30 minutter. ved 37 ° C Etter 3 ganger vasking i FSB tørkes preparatene i luft. For å eliminere ikke-spesifikk fluorescens, adsorberes antiviral serum før bruk med et homogenat av normal cellekultur, og FITC-konjugatet behandles med aktivert karbon i henhold til standardmetoder.

Følgende kontroller brukes som obligatoriske kontroller: preparater av uinfiserte kulturer behandlet på lignende måte og preparater av infiserte kulturer behandlet i første fase av normalt og heterologt antiviralt serum av samme art som immunserum til rotavirus.

I tilfelle av positive resultater observeres en tydelig lys grønn fluorescens i cytoplasmaet til cellene.

6.4. Elektroforotypemetode for rotavirus

Metoden er basert på identifisering av rotavirus ved bruk av polyakrylamidgelelektroforese av virale genomiske RNA-segmenter. Metoden tillater differensiering av rotavirusstammer på grunnlag av forskjeller i elektroforetisk mobilitet av individuelle RNA-segmenter av forskjellige isolater, og er derfor mye brukt i epidemiologiske studier. Metoden krever ikke forkultivering av isolater, har høy følsomhet og absolutt spesifisitet.

Metoden er av særlig interesse for epidemiologer i undersøkelsen av gruppesykdommer ved utbrudd av rotavirusinfeksjon.

Det kan utføres på basis av laboratorier utstyrt med elektroforeseapparater.

For analysen er 0,2-0,5 ml 10-20% fekal suspensjon tilstrekkelig. Suspensjonene ble behandlet med Freon 113 og inkubert med pronase (0,2 mg / ml, 15 min.) I nærvær av natriumdodecylsulfat (1%) og natrium-etylendiamintetraacetat (0,001 M). Etter tilsetning av natriumacetat (0,3 M) deproteiniziruyut RNA med fenol: kloroform: isoamyl alkohol og utfelt med 2,5 volumer etanol (18 timer ved -20 ° C eller 2 timer ved -70 ° C). Bunnfallet oppsamles ved sentrifugering, oppløses i vann og dissosieringsbuffer tilsettes. Elektroforese utføres ifølge metoden i Laemmli i plater av 10% gel. Sølvnitrat (0,011 M) brukes vanligvis til å flekke RNA i en gel. Etter manifestasjonsprosedyren i gelen er 11 bånd av RNA synlige, tilsvarende det rotavirus-genomiske segmentet.

6.5. Bestemmelse av klasse M immunoglobulin i serum

en pasient med rotavirusinfeksjon ved fastfase-metoden

koagglutineringsreaksjoner (TRCA)

Dette bruker prinsippet for fastfase-reaksjon koagglyutinatsii (se 4.3.4). I den modifikasjon: å sensibilisere brønner panel ved bruk av 0,1 ml kommersiell ram monospesifikt serum mot humant IgM, fortynnet 1: 1000. Paneler inkuberes i 2-4 timer ved 37 ° C. Deretter vaskes brønnene med FSBT, fylles med 3% gelatinoppløsning og la i 30 minutter ved 37 ° C. Brønnene vasket FSBT og gjorde 0,05 ml av de studerte, samt bevisst positive og negative sera, fortynnet 1: 100 FSBT (2 hull for hvert serum). Ved bestemmelse av antistofftiter blir dobbelt fortynninger av de testede prøvene undersøkt (1:10 - 1: 1280). Panelene inkuberes i 2 timer ved 37 ° C, og etter vask blir 0,05 ml diagnostisk og kontrollreagens innført i de parrede brønner. Reaksjonen tas i betraktning etter 1 - 2 timer (se over 4.3.4).

Det samme prinsippet, modifisert av TRCA, brukes til å teste IgA- og IgG-antistoffer for rotavirusinfeksjon, samt i analysen av kolostrum og melk for laktoglobuliner.

Metoden for å bestemme klasse M immunoglobulin i pasientens serum brukes til både tidlig diagnose av manifeste former og deres differensialdiagnose med asymptomatiske former for rotavirusinfeksjon.

7. Anti-epidemiske tiltak

Hvert tilfelle av akutt intestinal infeksjon forårsaket av rotavirus, særlig barn i det første år av livet, samt barn som går på barnehageinstitusjoner, trenger nøye epidemiologisk analyse for å identifisere kilden, hovedveiene og overføringsfaktorene for å kunne iverksette anti-epidemiske tiltak rettidig i utbruddet.

Tiltak for å identifisere og nøytralisere infeksjonskilden. Deteksjon av pasienter som er mistenkt for sykdommen, utføres av leger fra alle helseinstitusjoner: under polikliniske besøk, hjemmebesøk, medisinske undersøkelser av barn i institusjoner, sykehus, etc. De identifiserte pasientene er isolert fra barnegrupper. Medisinsk observasjon og behandling av pasienter kan utføres hjemme eller på sykehus. Barn som går til barns institusjoner som slippes ut fra sykehuset eller som har fullført hjemmebasert behandling med negative laboratorietester, blir tatt opp til barnegrupper på grunnlag av barnelege sertifikat. Barn som har hatt WG og fortsetter å utskille rotavirus (eller rotavirus antigen) med avføring uten kliniske manifestasjoner av infeksjon, kan bli tatt opp i barnehager og barnehage grupper av barnehager-barnehager underlagt organisering av kontinuerlig medisinsk observasjon og gjentatt laboratorieundersøkelse om 2-3 uker fra sykdomsutbrudd eller virusisolasjon.

Epidemiologisk undersøkelse av familiefokus hos pasienter med FG utføres med sykdommen hos barn under 2 år og voksne fra antall avbestemte kontingenter. Den epidemiolog går til barns institusjon med en undersøkelse om det er gjentatte tilfeller av ikke-bakteriell gastroenteritt.

Medisinsk observasjon av barn som kommuniserer med pasienter, utføres innen fem dager fra datoen for isolering av den siste syke personen.

Laboratorietesting for rotavirus (antigen) av barn og voksne som har kommunisert med pasienter, både i familien og i organiserte grupper, utføres på instruks fra infektiologen og epidemiologen dersom det foreligger indikasjoner (forekomst i familien eller i barnas team med gjentatte sykdommer OKI med en lignende klinikk) grovkrenkelse av sanitær og hygienisk regime, tilstedeværelse i utbrudd av arbeidstakere av næringsmiddelforetak og personer likestilt med dem, etc.). Obligatorisk laboratorieundersøkelse er underlagt mor til et sykt barn i det første år av livet. Personer i hvilke rotaviruser (antigen) er funnet i avføringen, er underlagt grundig klinisk undersøkelse av en smittsom spesialist. I mangel av kliniske manifestasjoner av sykdommen, er ikke barn og ansatte fra teamet isolert.

Ansatte i matforetak, vannforsyning etc. på tidspunktet for re-laboratorieundersøkelse og medisinsk tilsyn er ansatt i anlegget. Gjentatt laboratorieundersøkelse av personer som skiller ut rotavirus (antigen) i avføringen, som ble holdt på hensikt og infeksjonssykdom epidemiolog ved intervaller på 5 - 7 dager, ved hjelp av komplekse laboratorietester.

Dersom det oppstår gruppesykdommer hos barns institusjoner, utføres karantene i løpet av 5 dager fra det øyeblikk isolasjonen av den siste pasienten er avsluttet.

Institusjonene gjennomfører regelmessig sanitær og pedagogisk arbeid for å hindre rotavirusinfeksjon.

Tiltak rettet mot å bryte mekanismen for overføring av infeksjon.

Studier har oppnådd en skadelig effekt på rotavirus ved +70 ° C etter 15 minutter; Når de blir utsatt for ultrafiolett stråling, blir også rotavirus inaktivert etter 15 minutter.

Når det gjelder deres motstand mot virkningen av vanlige desinfeksjonsmidler, er rotavirus nært av enterovirus og hepatitt A. Derfor er det i sentrene av rotavirusinfeksjon og på sykehus hvor det er pasienter, hensiktsmessig å gjennomføre desinfeksjonstiltak i henhold til regimer og bruke midler som anbefales for viral hepatitt A- og enterovirusinfeksjoner (Vedlegg nr. 4 til Helse- og helsedepartementets orden i Sovjetunionen N 752 av 07/08/81 og Seksjon for helsedepartementet i Sovjetunionen N 916 av 08/04/83). Spesiell oppmerksomhet bør rettes mot riktig håndtering av hendene på personer som serverer barna, samt brystvorter, leker, retter og andre gjenstander for pasientbehandling.

Regelmessig ultrafiolett bestråling anbefales. Ultrafiolett stråling utføres vanligvis ved hjelp av irradiatorer - OBN-150 på 30 kubikkmeter. m rom, OBP-300 60 cu. m rom og andre. Unshielded feeds satt til en hastighet på 1 - 1,5 W per 1 cu. m rom i fravær av mennesker (for å unngå skade på slimete øyne), skjermet - med en hastighet på 2 - 2,5 W per 1 cu. m, bestråling kan utføres i nærvær av mennesker. Desinfeksjonstid - 30 - 40 minutter. Luftbestråling bør utføres etter rengjøring av rommet, bytte av sengetøy og annet arbeid relatert til dannelsen av støv-aerosol.

I spesialiserte avdelinger på sykehuset skal personalet bruke respiratoriske masker.

Organiseringen av hygieniske og hygieniske tiltak for å hindre rotavirusinfeksjon utføres i samsvar med gjeldende instruksjoner og anbefalinger for andre infeksjoner med den fekale orale mekanismen for spredning av patogenet.

En av de effektive tiltakene for å forhindre rotavirusinfeksjon hos nyfødte er deres amming.

Spesifikk forebygging av rotavirusinfeksjon utføres ikke.